Effects of donor plant age and explants on in vitro culture of Cedrela montanaMoritz ex Turcz

Para evaluar el potencial organogénico de Cedrela montanaMoritz ex Turcz, se colectaron explantes de árboles maduros (10-20 años) y juveniles (7-18 meses). Los primeros incluyeron yemas,hojas y nudos de brotes juveniles (ubicados hacia la parte basal deltronco) y rejuvenecidos (obtenidos a partir de estacas). Los segundoshojas, peciolos, nudos, entrenudos y nudos de brotes elongados invitro. Los nudos de árboles juveniles presentaron el mayor potencialorganogénico, ya que el 45,8% de los explantes presentaron elongaciónde yemas axilares y el 56,2% enraizamiento en medio sin reguladoresde crecimiento. El 51% de los brotes elongados formaron brotesadventicios con 0.5 μM NAA y 0.5 μM BA, el 30% con 0.5 μM NAAy 1 μM BA, y el 30% con 1 μM BA; y el 20% raíces con 0,5 μM NAA.La formación de raíces se vio estimulada con la adición de carbónactivado (5 gL-1) en el medio. El 80% de las plántulas regeneradas apartir de nudos y el 72,5% de las provenientes de brotes generadosin vitro se aclimataron exitosamente. Por el contrario, explantesde árboles maduros presentaron baja respuesta organogénica.Elongación de yemas axilares fue registrada solamente en 10.7% delos nudos de brotes juveniles y en 6.7% de aquellos provenientes debrotes rejuvenecidos. En conclusión, la edad de la planta donadoray el tipo de explante influyen sobre el potencial organogénico de C.montana. Este estudio contribuyó al conocimiento de la respuesta deesta especie bajo condiciones in vitro...

To evaluate the organogenic potential ofCedrela montana Moritz ex Turcz, explants from mature(10-20 year-old) and juvenile (7-18 month-old) treeswere collected. The first grouping included buds, leaves,and nodes derived from juvenile basal offshoots andrejuvenated shoots from cuttings. The second, includedleaves, petioles, nodes, internodes and nodes of in vitroelongated shoots. The highest organogenic potential wasobserved in nodes from juvenile trees: 45.8% of explantspresented axillary bud elongation, while 56.2% presentedrooting in a growth regulator free culture medium. Fiftyonepercent of elongated shoots produced adventitiousshoots with 0.5 μM NAA and 0.5 μM BA; 30% with0.5 μM NAA and 1 μM BA; and 30% with 1 μM BA.Twenty percent presented roots with 0.5 μM NAA. Rootformation was stimulated in a medium supplementedwith activated charcoal (5 gL-1). The acclimatizationof eighty percent of plantlets regenerated from nodes,and of 72.5% in vitro generated shoots was successful.On the contrary, mature trees material presented loworganogenic response. Axillary bud elongation wasrecorded just in 10.7% of explants from juvenile shootsand in 6.7% of explants from rejuvenated shoots. Inconclusion the age of donor plant and type of explantaffect the organogenic potential of C. montana. Thisstudy contributes to the understanding of this species’response under in vitro conditions...

Para avaliar o potencial organogênico da Cedrela montanaMoritz ex Turcz, explantes derivados de árvores adultas (10-20 anos)e jovens (7-18 meses) foram coletados. O primeiro incluiu brotos,folhas, e nós derivados de brotações jovens (localizado na direçãoda parte basal do tronco) e rejuvenescida (obtido a partir de estacas).O segundo incluía folhas, pecíolos, nós, entrenós e nós de brotosalongados in vitro. Maior potencial organogênico foi observado emnós de árvores jovens, em que o alongamento de brotos foi obtidoem 45,8% dos explantes e o enraizamento atingiu 56,2% em meiosem reguladores de crescimento. Brotos adventícios foram induzidasem 51% dos rebentos gerados in vitro com 0.5 μM NAA e 0.5 μM BA;30% de indução ocorreu com 0.5 μM NAA e 1 μM BA; 30% com 1μM BA. Raízes adventícias foram induzidas em 20% dos rebentoscom 0,5 μM NAA. Formação de raízes foi estimulada com carvão ativado(5 gL-1) no meio. 80% das plântulas regeneradas a partir de nós e 72,5%das plântulas a partir de brotações obtidas in vitro foram aclimatizadascom sucesso. Em contraste, explantes derivados de árvores adultasapresentou resposta organogênica baixo. Alongamento de brotos degemas axilares foi registrado somente em 10,7% dos nós de brotaçõesjovens e 6,7% das brotações ejuvenescidas. Em conclusão a idade daplanta doadora e o tipo de explante afeta o potencial de organogênesein vitro da C. montana. Este estudo contribuiu para o conhecimento daresposta desta espécie sob condições in vitro...

Analysis of diversity among six populations of Colombian mango (Mangifera indica L. cvar. Hilacha) using RAPDs markers

Currently in Colombia, there are only records of morph-agronomic characterizations of Mangifera indica cvar. Hilacha; molecular studies on this mango variety have not been carried out. The aim of this work was to identify the genetic diversity of six populations of mango Hilacha by RAPDs markers, as a fundamental base for breeding programs, conservation and selection of promissory materials for the fruit industry at the national level. From 60 primers evaluated in the populations, five primers were selected and were launched in the six populations. Polymorphic bands of RAPDs were transformed into binary matrices, which were then processed with NTSYS-PC, POPGENE and TFPGA softwares. The overall genetic diversity, H T = 0.468 +/- 0.0016, is very similar to the average subpopulation genetic diversity, H S = 0.4431 +/- 0.0024, which revealed a small genetic differentiation among the mango Hilacha populations studied (G ST = 0.0532). This means that each population contained in average 95 percent of the total genetic diversity found in the global population analyzed. Considerable gene flow between populations (Nm = 9) was found. Finally, we recommend studying the genetic diversity of mango Hilacha populations with other molecular markers to complement the information obtained and to find similarities or differences with the results presented herein.

Regenerácion in vitro de tres variedades de crisantemo (Dendrathema grandiflora) a través de organogénesis y embriogénesis somática / In vitro regeneration of three chrysanthemum (Dendrathema grandiflora) varieties via organogenesis and somatic embryogenesis

El crisantemo (Dendrathema grandiflora) presenta alta demanda en los mercados de flor cortada, tanto colombianos como internacionales. La producción de esta especie se ve seriamente afectada por enfermedades fúngicas como la roya Blanca (Puccinia horiana), lo que ocasiona que se empleen grandes cantidades de fungicidas aumentando los costos de producción a nivel económico y ecológico. La evaluación de sistemas de regeneración in vitro de crisantemo a partir de discos de hoja constituyó un primer paso hacia el empleo de la transformación genética, como apoyo a las técnicas de mejoramiento convencional para la obtención de plantas resistentes al hongo. Se establecieron discos de hoja de D. grandiflora var. Escapade, var. White albatross y var. Yellow albatross sobre medio MS en presencia ANA (0 - 4.83 mM) y BAP (0 - 13.32 mM) solos y en combinación. Así mismo, se establecieron discos foliares de las tres variedades en estudio sobre el medio MumB en presencia 2,4-D (0 - 4.52 mM) durante 7, 14 y 21 días, tiempo en el cual los explantes fueron transferidos a medio a medio Mum B sin 2-4D. Los brotes regenerados, fueron individualizados, enraizados y endurecidos. Los resultados obtenidos indican que el medio MS suplementado con: ANA 4.83 mM + BAP 4.44 mM ó ANA 4.83 mM y BAP 13.32 mM permite la regeneración de plantas vía organogénesis para las tres variedades y que es posible obtener embriones somáticos de las tres variedades, sobre medio Mum B en presencia de 2,4-D 2.26 mM, con periodos de incubación de 14 días para White Albatross y 21 días para Yellow Albatros y Escapade. El medio Mum B sin 2,4-D, permite el desarrollo de los brotes, a partir de embriones somáticos en los tres casos. El 85 por ciento de los brotes obtenidos presentaron enraizamiento espontáneo, lo que facilitó el endurecimiento y transferencia exitosa a suelo.

Chrysanthemum (Dendrathema grandiflora) has a high demand in the Colombian and international cut flower markets. Since commercial production of this ornamental species is strongly affected by fungal diseases such as chrysanthemum white rust (Puccinia horiana), high doses of fungicides are being used posing increased environmental and commercial costs. Assessment of in vitro regeneration systems from leaf discs was a first step in developing a plant genetic transformation protocol to obtain fungi-resistant plants. Leaf discs of White Albatross, Yellow Albatross, and Escapade varieties were established in vitro on MS medium supplemented with NAA (0 - 4.83 μM) and BAP (0 - 13.32 μM) alone and in combination. Leaf discs were also cultured on MumB medium containing 2,4-D (0 - 4.52 μM) for 7, 14, and 21 days prior to their transferral to a 2,4-D free MumB medium. Regenerated shoots were individualized, rooted, and hardened. Results show that MS with 4.83 μM NAA + 4.44 μM BAP and 4.83 μM NAA + 13.32 μM BAP induce organogenesis, and MumB with 2.26 μM 2,4-D induces somatic embryogenesis on all three varieties, with exposition periods to 2,4-D of 14 days for White Albatross and 21 days for Yellow Albatross and Escapade. Shoot development from somatic embryos was observed in the three varieties when cultured on a 2,4-D free MumB medium. Spontaneous rooting was recorded in 85% of the shoots thus facilitating hardening and successful transfer to soil.

Propagación in vitro de material seleccionado de Tabebuia rosea (Bertol) DC (Ocobo) y Cordia alliodora (Ruiz & Pav) Oken (Nogal Cafetero) / In vitro propagation of Tabebuia rosea (Bertol DC) (large spreading cedar) and Cordia alliodora (Ruiz & Pav) Oken (coffee-shading walnut)

El presente trabajo tuvo por objetivo multiplicar y mantener in vitro plantas de Tabebuia rosea y de Cordia alliodora, a partir de semillas de cinco árboles plus de la primera especie y uno de la segunda. A partir de este material se seleccionaron plantas núcleo (PN), Yemas apicales de las plantas núcleo obtenidas, fueron removidas y cultivadas bajo condiciones in vitro hasta producir 1480 plantas de las dos especies. El proceso de aclimatización del material vegetal se llevó a cabo bajo condiciones de invernadero, en cámaras húmedas ubicadas en la estación experimental "Bambusa" en Pacho, Cundinamarca. Para el manejo de la información, se diseñó una base de datos en el programa Access, Microsoft Office®, con el fin de monitorear y evaluar el comportamiento de cada uno de los individuos durante el desarrollo in vitro, por medio del cálculo de tasas de velocidad de multiplicación (TVM), tasa de pérdida (TP) y tasa de eficiencia del proceso (TE). Este material será entregado a Conif para el establecimiento de la primera plantación de origen in vitro, que será utilizada posteriormente para ensayos de propagación vegetativa, análisis de pruebas clonales y moleculares.

This work was aimed at multiplying and maintaining in vitro plants from seedlings from five Tabebuia rosea (large spreading cedar tree) from and one Cordia alliodora (walnut tree used for providing shade for coffee plantations). Apical leaf buds were excised from mother plants (MP) and cultured in vitro until 1480 plants had been produced from the two species. The hardening process was carried out in greenhouse conditions using humid flow-chambers at Geoambiente Ltda’s Bambusa experimental station in Pacho, Cundinamarca. A database was created using Microsoft Office Access software for handling information required for monitoring and evaluating each plant’s behaviour during the in vitro culture process by calculating the rates of multiplication (RM) and loss(RL). The plants so produced will be used by Conif for field trials and evaluation purposes. This material will then be multiplied by vegetative propagation and used for clone and molecular testing analysis.